Museum Kereta Api Ambarawa merupakan salah satu museum yang memiliki banyak koleksi kelengkapan kereta api yang pernah memiliki kejayaan di masa dulu, masa jaman penjajahan. Namun seiring dengan perkembangan waktu serta teknologi Museum Kereta Api Ambarawa dialih fungsikan menjadi sebuah museum yang menjadi salah satu wisata sejarah di kabupaten Semarang Jawa Tengah.
Di museum ini terdapat kereta api uap bergerigi yang sangat unik dan merupakan salah satu dari tiga kereta api uap yang tersisa di seluruh dunia. Sedangkan dua diantaranya ada di Negara India dan Swiss. Salah satu kereta api uap dengan lokomotif nomor seri B 2502 dan B 2503 yang di buat oleh Maschinenfabriek Esslingen, serta B 5112 buatan Hannoversche Maschinenbau AG yang berada di museum ini sampai sekarang masih berfungsi dan dapat menjalankan aktivitas sebagai kereta api wisata.